תוֹכֶן
כתם גרם, או פשוט גרם, הוא טכניקה מהירה ופשוטה שמטרתה להבדיל חיידקים על פי מאפייני דופן התא שלהם לאחר חשיפה לצבעים ופתרונות שונים.
כך, באמצעות צביעת גראם ניתן לבדוק בנוסף לצורת החיידקים גם את הצבע שהם מקבלים, ותוצאה זו חשובה להגדרת אסטרטגיות אחרות לזיהוי מיני החיידקים ולרופא להצביע על טיפול מונע על פי מאפיינים שנצפו במיקרוסקופ.
צביעת גרם מתבצעת בדרך כלל באופן שגרתי במעבדה והיא חלק מבדיקת הבקטריוסקופיה. להבין מהי בקטריוסקופיה וכיצד היא נעשית.
איך עושים כתם גרם
כתם גרם הוא שיטה מהירה, מעשית וזולה לזיהוי חיידקים האחראיים לזיהומים, כשהיא מועילה לרופאים להצביע על טיפול מונע בזיהום שעשוי להתרחש, מכיוון שמאפיינים ספציפיים של קבוצות חיידקים אלה ידועים.
צביעת גרם נעשית בשבעה שלבים עיקריים, אולם הפרוטוקול עשוי להשתנות בהתאם למעבדה:
- הציבו כמה מושבות של החיידק על השקופית, הוסיפו טיפת מים כדי להקל על הומוגניזציה של המושבות;
- תן לו להתייבש מעט, והלהב יכול לעבור במהירות דרך הלהבה כדי להעדיף ייבוש, אולם חשוב לשים לב לטמפרטורה, שכן אם הטמפרטורה גבוהה מדי יתכן שיש שינוי במבנה החיידקים, אשר יכול להפריע לתוצאה המבחן;
- כאשר השקופית יבשה, מכסים בצבע הגביש הסגול ונותנים לו לפעול כדקה;
- שטפו את השקף בזרם מים זורמים וכסו את השקף עם לוגול, שמטרתו קיבוע הצבע הכחול, ותנו לו לפעול למשך דקה אחת. שני סוגי החיידקים יכולים לספוג את הקומפלקס שנוצר על ידי הצבע והלוגול, לכחול;
- לאחר מכן, שטפו את השקף במים זורמים ומרחו 95% אלכוהול והשאירו אותו לפעול למשך 30 שניות. אלכוהול אחראי על המסת קרום השומנים היוצר חיידקים שליליים בגרם ובכך, הסרת המתחם שנוצר בין הצבע ללוגול, תוך שינוי צבע החיידקים הללו. עם זאת, במקרה של חיידקים חיוביים בגרם, אלכוהול מייבש את דופן התא של חיידקים חיוביים בגרם, מה שגורם להתכווצות הנקבוביות והופך אותן לאטימות;
- לאחר מכן, שטפו שוב במים זורמים וכסו את השקף בצבע השני, בפוקסין או בספרנין והניחו לו לפעול למשך 30 שניות;
- לאחר מכן, שטפו את השקף מתחת למים זורמים והניחו להתייבש בטמפרטורת החדר.
ברגע שהשקופית יבשה, ניתן לשים טיפה של שמן טבילה ולהתבונן בשקופית מתחת למיקרוסקופ עם מטרה של פי 100, ניתן לבדוק נוכחות או היעדרות של חיידקים, כמו גם נוכחות שמרים ותאי אפיתל.
לשם מה זה
לצביעת גרם יש מטרה עיקרית להבדיל חיידקים על פי מאפייני דופן התא והמורפולוגיה הכללית. לפיכך, על פי המאפיינים שנצפו במיקרוסקופ, ניתן לסווג חיידקים ל:
- חיידקים חיוביים-גראמיים, שמוצגים בצבע כחול בעיניהם, בגלל העובדה שהם אינם צבעי אלכוהול, מכיוון שיש להם דופן תא עבה יותר ונקבוביותיהם מתכווצות כאשר הם נחשפים לוגול;
- חיידקים שליליים של גראם, המוצגים בצבע ורוד / סגול בזכות העובדה שהם מוכתמים על ידי אלכוהול ומוכתמים בספרנין או פוקסין.
לאחר צפייה בחיידקים תחת המיקרוסקופ, יתכן שבבדיקות נוספות יבוצעו במעבדה לזיהוי מיני החיידק. עם זאת, באמצעות ה"גראם "והקשר עם סימנים ותסמינים המוצגים על ידי האדם, יכול הרופא להצביע על טיפול מונע עד לקבלת תוצאה של בדיקות ספציפיות יותר, מכיוון שבכך ניתן להפחית את קצב שכפול החיידקים ולמנוע סיבוכים.